實驗流程：
1． 切片常規(guī)脫蠟至水。如需抗原修復(fù)，可在此步后進行
2.緩沖液洗 3min/2 次。
3. 為了降低內(nèi)源性
過氧化物酶造成的非特異性背景染色，將切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分鐘。
4. 緩沖液洗 5min/2 次。
5. 滴加 Ultra V Block ， 在室溫下孵育 5 分鐘以封閉非特異性的背景染色。
（注：孵育不要超過 10 分鐘，否則會導(dǎo)致特異性染色降低。如果一抗的
稀釋液中含有 5 － 10% 正常羊血清，這一步可以省略。）
6. 緩沖液洗 5min/2 次。
7. 滴加一抗工作液 37 ℃
孵育 1 － 2 小時。（具體孵育時間和溫度由試驗者終決定）
8. 緩沖液洗 5min/2 次。
9 ． 滴加 Primary Antibody Enhancer（
增強子），在室溫下孵育 20 分鐘。
10 ．緩沖液洗 5min/2 次。
11 ．滴加 HRP Polymer（酶標二抗） ，在室溫下孵育 30 分鐘。
（注：HRP Polymer 對光敏感，應(yīng)避免不必要的光暴露并儲存在不透明的小瓶中。）
12 ．緩沖液洗 5min/2 次。
13 ．向 1ml DAB Plus Substrate （或 AEC Plus Substrate) 中滴加 1-2 滴 DAB Plus Chromogen （或 AEC Plus Chromogen），混勻后滴加到切片上，孵育 3 － 15 分鐘。（具體時間由染色深淺決定。）
14 ．自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明，封片。
